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空气中悬浮微生物的测定有多种，但其测定的基本过程都是经过捕集-培养-计数的过程。目前普遍采用的是浮游菌和沉降菌的测试方法。浮游菌测试方法是通过收集悬浮在空气中的生物粒子于专门的培养基平皿，经若干时间在适宜的生长条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以此来判定洁净环境内单位体积空气中的活微生物数。沉降菌测试方法是通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数。
1、检测要求
（1）检测前，被测洁净室的运行状态必须在正常状态，其温度、湿度、风量、风压及风速必须在控制的规定值内；被测试的洁净室(区)应已进行过消毒；同时，洁净室的测试状态必须符合生产工艺的要求，并在测试报告中注明其测试状态。
（2）测试人员必须穿戴洁净服，而且一般不得超过两个人。
（3）净化空调系统正常运转时间，对单向流如5级（100级）洁净室或层流工作台不得少于10min；对非单向流如7级（10000级）、 8级（100000级）的洁净室不得少于30min。
（4）采样点的布置及要求：
a.浮游菌测试时，采样点位置可以与悬浮粒子测试点相同。工作区测点位置距地面0.8～1.5m（略高于工作面）；送风口测点位置距送风面30cm左右。根据需要可在关键设备或关键工作活动范围处增加测点。采样点的布置应力求均匀，避免局部区域过于集中或稀疏。
b.沉降菌测试时，采样点的位置可以与悬浮粒子测试点相同。工作区采样点的位置距地面0.8～1.5m（略高于工作面）；根据需要可在关键设备或关键工作活动范围处增加测点，采样点的布置应力求均匀。
2、检测方法
（1）浮游菌的检测方法
1）首先应对测试仪器、培养皿表面进行严格消毒。采样器进入被测房间前先用消毒房间的消毒剂灭菌，用于100级洁净室的采样器宜一直放在被测房间内；用消毒剂擦净培养皿的外表面，把采样器的顶盖、转盘以及罩子内外消毒干净；采样口及采样管在使用前必须高温灭菌。
2）采样者应穿戴与被测洁净室相应的洁净服，在转盘上放入或调换培养皿前，双手要用消毒剂消毒。
3）开动真空泵抽气，使仪器中的残余消毒剂蒸发， 时间不少于5min，并调好流量、转盘转速。
4）关闭真空泵，放入培养皿，盖好盖子后调节采样器。
5）置采样口于采样点后，依次开启采样器、真空泵，转动定时器，根据采样量选定采样时间。
6）全部采样结束后，将培养皿倒置于30～35℃恒温培养箱中培养，时间不少于45h。
7）用肉眼直接计数，然后用5～10倍放大镜检查，是否有遗漏。若平板上有两个或两个以上的菌落重叠，分辨时仍以两个或两个以上菌落计数。
（2）沉降菌检测方法
1）首先也是对测试仪器、培养皿表面进行严格消毒灭菌，在37℃恒温培养箱中培养48h观察，确信无菌后方可使用。
2）一般用Ø90mm的沉降平皿，注人20mL培养基，放在测点处，开盖暴露30min，将培养皿盖盖上后倒置。然后在30～35℃恒温培养箱中经48h培养为肉眼计菌落数，并记录生成的菌落数CFU，然后用5～10 倍放大镜检查，是否有遗漏。若培养皿上有两个或两个以上的菌落重叠，分辨时仍以两个或两个以上菌落计数。
3、检测仪器
（1）浮游菌测试仪器
1）仪器设备主要有采样器、真空抽气泵、培养皿、恒温培养箱等。
2）微生物采样器有多种形式，主要有固体撞击式采样器、离心式空气微生物采样器、气旋式微生物气溶胶采样器、液体冲击式微生物气溶胶采样器、过滤式微生物气溶胶采样器、大容量静电沉降采样器等。采样器的选择应考虑采样器的灵敏度、采样效率，以及有利于微生物的存活、易于分析粒子大小、 易于操作和使用方便等因素。浮游菌采样器一般采用狭缝式采样器和离心式采样器。
3）狭缝式采样器(撞击式采样器)。各类狭缝式采样器工作原理都相同。将采集的微生物气溶胶喷射到缓慢旋转的撞击板或固体培养基表面上，具有足够大运量的粒子撞击到收集板上，而较小粒子由于惯性小在气流夹携下流出。每种型号的撞击式采样器都有其自身的收集效率。例如国产的THK-201型采样器，属于固体惯性撞击式，打开电源后用真空抽气，悬浮于空气中的带菌粒子被吸入采样头的筛孔筛，该采样器的特点是采样头筛孔隙是可调的，当空隙调小时，可用于采集较小粒子；若要采集大粒子时，可将空隙调大，从而增大了采样器的应用范围。
4）离心式采样器基于离心撞击原理，当采样器通电后，借助于蜗壳内的叶轮高速旋转，能把至少40cm距离以内被测的带菌空气吸入，在离心力的作用下，空气中的活微生物粒子加速撞击到的培养基条上，采样后的培养基条从蜗壳中取出，经过恒温、定时培养，形成菌落，然后进行菌落计数。国内研制生产的JWC-1型采样器便是一种性能较好的离心式空气微生物采样器，采样量为40L/min。
（2）沉降菌测试所用的仪器设备
主要有高压消毒锅、恒温培养箱、培养皿。培养皿一般采用Ø90mm*15mm的硼硅酸玻璃培养皿，培养基采用普通肉琼脂培养基或《中华人民共和国药典》认可的其他培养基。
4、合格标准
国内外有关浮游菌测定的标准：
国内外有关沉降菌测定的标准：
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